NRPB52L 重組蛋白L瓊脂糖凝膠FF

                                      發布日期:2018-10-27 閱讀次數:7964

                                      品  名:重組蛋白L瓊脂糖凝膠FF

                                      英文名:Recombinant Protein L NUPharose Fast Flow, rProtein L NUPharose FF

                                      目錄號:NRPB52L、NRPB52S(預裝柱)

                                      規  格:20 ml,100 ml,1L,1 ml預裝柱,5 ml預裝柱,特殊規格訂制

                                      運  輸:2 ~ 25℃,常壓、避光

                                      貯  存:20%乙醇,2-8℃

                                      保質期:3年


                                      相關介紹:

                                      重組蛋白L瓊脂糖凝膠FF是將重組大消化鏈球菌蛋白L(Recombinant Peptostreptococcus magnus Protein L,簡稱r-PPL)偶聯在高度交聯的瓊脂糖凝膠上的一種親和純化介質。大消化鏈球菌蛋白L(PPL)能與抗體的κ輕鏈結合而不會影響抗體的抗原結合位點,這一特性使其與結合抗體Fc區域的蛋白A、蛋白G相比,能更廣泛地結合各種來源及亞類的抗體。如人類的IgG、IgM、IgA、IgE、IgD,以及含κ輕鏈(人類1、3、4型,小鼠1型)的Fab、scFv等抗體片段。但不能與重鏈、λ輕鏈、κ輕鏈(2型)結合,所以重組蛋白L瓊脂糖凝膠FF不能純化牛、山羊、綿羊、雞來源的抗體。


                                      技術指標:

                                      基質

                                      4%高度交聯瓊脂糖凝膠

                                      配基

                                      重組蛋白L

                                      配基密度

                                      6 mg/ml

                                      填料粒徑

                                      60~180 μm

                                      最大流速

                                      800 cm/h

                                      推薦流速

                                      20-100 cm/h

                                      工作(清洗)pH

                                      2~9(2~10)

                                      0.3 MPa

                                      載量

                                      40 mg/ml human IgG


                                      抗體與蛋白A、蛋白G的結合力:

                                      種類

                                      Species

                                      亞型

                                      Antibody Class

                                      蛋白A

                                      Protein A

                                      蛋白G

                                      Protein G

                                      蛋白L

                                      Protein L

                                      Human

                                      IgG1

                                      IgG2

                                      IgG3

                                      IgG4

                                      IgM

                                      IgD

                                      IgA

                                      Fab

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                                      小鼠

                                      Mouse

                                      IgG1

                                      IgG2a

                                      IgG2b

                                      IgG3

                                      IgM

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                                      大鼠

                                      Rat

                                      IgG1

                                      IgG2a

                                      IgG2b

                                      IgG2c

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                                      Cow

                                      IgG1

                                      IgG2

                                      +

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                                      山羊

                                      Goat

                                      IgG1

                                      IgG2

                                      +

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                                      Horse

                                      IgG(ab)

                                      IgG(c)

                                      IgG(T)

                                      +

                                      +

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                                      NA

                                      NA

                                      NA

                                      Rabbit

                                      IgG

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                                      Pig

                                      IgG

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                                      Dog

                                      IgG

                                      +++

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                                      NA

                                      Chicken

                                      IgY

                                      -

                                      -

                                      -

                                      注:-表示不結合;+表示微弱結合;++表示中等結合;+++表示很強結合;NA表示暫無數據。能用于親和純化的抗體一般需要中等以上的結合力。


                                      應用舉例:

                                      結合緩沖液:20 mM磷酸鹽緩沖液(PB),pH 7.4

                                      洗脫緩沖液:0.1 M檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液,pH 2.7

                                      中和緩沖液:1 M Tris-HCl,pH 9.0

                                      1)1 ml重組蛋白L瓊脂糖凝膠FF預裝柱,用5~10個柱床體積的蒸餾水洗去保存液;

                                      2)用結合緩沖液平衡 5~10個柱床體積;

                                      3)將3 ml小鼠腹水用結合緩沖液稀釋至15 ml,0.45 μm濾膜過濾上樣;

                                      4)用結合緩沖液平衡 5~10個柱床體積至基線;

                                      5)用洗脫緩沖液洗脫抗體,收集洗脫峰,并用中和緩沖液調節其pH至中性;

                                      6)每次使用后再用3~5個柱床體積的洗脫緩沖液再生清洗;

                                      7)SDS-PAGE(圖1)電泳分析洗脫下來的小鼠單抗純度在95%以上。



                                      注意事項:

                                      1)預填柱使用簡易方便,在沒有儀器設備的條件下也可以完成純化任務。

                                      2)樣品洗脫后一般pH很低,應立即用堿性中和緩沖液(如1 M Tris-HCl,pH 9.0) 將收集到的抗體溶液中和到中性,或在收集容器中事先裝5%~20%、pH 7-9的緩沖液(如1 M Tris-HCl或1 M 磷酸緩沖液),以利于維持抗體的生物活性,避免抗體失活。

                                      3)使用時保證柱子和緩沖液的溫度一致,避免柱床內產生氣泡,影響純化效果,如果已經產生氣泡,可以自行重裝柱子。

                                      4)通常目標樣品洗脫后應繼續用0.1 M檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液(pH 2.0~2.7)洗3~5個柱體積,然后用平衡緩沖液清洗5個柱體積以上,作簡易再生。

                                      5)使用數次后應進行在位清洗,建議用0.1% Triton X-100 37℃洗1-3個柱體積(10~30min),立即用平衡緩沖液清洗5個柱體積以上;或70%乙醇洗5個柱體積以上(可保持4~16h),再用平衡緩沖液清洗5柱體積以上;或10mM NaOH洗1-3個柱體積(10-20min),再用平衡緩沖液清洗5柱體積以上。在位清洗能去除強疏水性蛋白質和脂類,恢復柱子的載量和流速。


                                      導購指南

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                                      規格

                                      產品描述

                                      重力預裝柱

                                      重組蛋白L瓊脂糖凝膠FF重力預裝柱

                                      ProL NUPharose FF pre-packed column

                                      NRPB52S-Z11

                                      1*1mL

                                      1支*1ml

                                      NRPB52S-Z41

                                      4*1mL

                                      4支*1ml

                                      NRPB52S-Z15

                                      1*5mL

                                      1*5mL

                                      NRPB52S-Z25

                                      2*5mL

                                      2支*5mL

                                      AKTA中壓預裝柱

                                      重組蛋白L瓊脂糖凝膠FF中壓預裝柱

                                      ProL NUPharose FF pre-packed column

                                      NRPB52S-Y11

                                      1*1mL

                                      1支*1ml

                                      NRPB52S-Y41

                                      4*1mL

                                      4支*1ml

                                      NRPB52S-Y15

                                      1*5mL

                                      1*5mL

                                      NRPB52S-Y25

                                      2*5mL

                                      2支*5mL

                                      填料

                                      重組蛋白L瓊脂糖凝膠FF

                                      ProL NUPharose FF

                                      NRPB52L-10

                                      10mL

                                      1瓶*10ml

                                      NRPB52L-20

                                      20mL

                                      1瓶*20ml

                                      NRPB52L-100

                                      100mL

                                      1瓶*100ml

                                      NRPB52L-500

                                      500ml

                                      1瓶*500ml

                                      注:紐龍生物填料體積為實際瓊脂糖凝膠體積




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