NRPB42S Strep-Tactin瓊脂糖凝膠FF預裝柱

                                      發布日期:2018-10-27 閱讀次數:7702

                                      品  名:Strep-Tactin瓊脂糖凝膠FF

                                      英文名:Strep-Tactin NUPharose Fast Flow, Strep-Tactin NUPharose FF

                                      目錄號:NRPB42L、NRPB42S(預裝柱)

                                      規  格:20 ml,100 ml,1L,1 ml預裝柱,5 ml預裝柱,特殊規格訂制

                                      運  輸:2 ~ 25℃,常壓、避光

                                      貯  存:20%乙醇,2 ~ 8℃

                                      保質期:3年


                                      相關介紹: 

                                      Strep-Tactin瓊脂糖凝膠FF是一種將Strep-Tactin鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的生物親和層析分離介質,主要用于純化Strep II標簽蛋白。Strep II標簽為8個氨基酸的小標簽(WSHPQFEK),由于標簽小,僅為1 kDa左右,一般不影響融合后蛋白質的結構和功能,常用于融合表達蛋白質的檢測和純化。


                                      本產品的配基Strep-Tactin是鏈霉親和素(Streptavidin)的突變體,與鏈霉親和素相比,Strep-Tactin對Strep II標簽的親和能力至少強10倍以上,能夠在溫和的條件下與Strep II融合蛋白結合和解離。由于Strep-Tacin對Strep II標簽具有高度特異性,一般一步純化就能獲得高純度的蛋白質樣品。


                                      Strep II標簽蛋白與凝膠結合后可使用脫硫生物素競爭方式進行洗脫,該洗脫方式比較溫和,一般不會影響蛋白質的性質。如Strep II標簽蛋白質能耐受堿性條件,也可用堿液洗脫,比如10 mM NaOH等。

                                      Strep-Tactin瓊脂糖凝膠FF能耐受較高的堿性條件,可以用0.5 M NaOH進行再生清洗和去除熱源等。


                                      另外,2-(4-羥基苯唑)苯甲酸(HABA)也可用于凝膠再生,過量的HABA能以競爭的方式替換脫硫生物素,但在無HABA的緩沖液中, Strep-Tactin與HABA會發生解離,從而使HABA脫落,實現再生。


                                      技術指標:

                                      基質

                                      4%瓊脂糖凝膠微球

                                      配基

                                      Strep-Tactin

                                      配基密度

                                      ≥5 mg/ml

                                      填料粒徑

                                      60 ~ 180 μm

                                      最大流速

                                      800 cm/h

                                      推薦流速

                                      20 ~ 100 cm/h

                                      pH穩定性

                                      短時間pH 2 ~ 13;長時間pH 4 ~ 11

                                      耐反壓

                                      0.3 MPa

                                      載量

                                      ≥6 mg/ml Strep II標簽蛋白


                                      使用方法:

                                      1 推薦緩沖液

                                      純化Strep II標簽蛋白

                                      結合緩沖液:100 mM Tris-HCl,150 mM NaCl,1 mM EDTA,pH 8.0;

                                             或20 mM NaH2PO4,280 mM NaCl,6 mM KCl,pH 7.4


                                      洗脫緩沖液:結合緩沖液 + 2.5 mM 脫硫生物素;

                                             或10 mM NaOH


                                      再生緩沖液:0.5 M NaOH;

                                             或結合緩沖液+1 mM HABA


                                      2 樣品準備

                                      上柱的樣品應盡量保持與結合緩沖液一致。通??捎猛肝?、超濾、稀釋等方法處理樣品。并且上柱前應過0.45 μm濾膜或高速離心去除不溶物。


                                      3 樣品純化

                                      3.1 平衡:取適量的Strep-Tactin瓊脂糖凝膠FF裝入合適的層析柱中,用蒸餾水清洗5個柱體積去除保存液,再用結合緩沖液平衡5個柱體積,建議流速為100 cm/h。

                                      3.2 上樣:將準備好的樣品上柱,建議流速為20 ~ 100 cm/h,可根據實際結合情況選擇流速,能獲得較好的效果。

                                      3.3 再平衡:上樣后用結合緩沖液平衡10個柱體積以上,或平衡至基線,洗去雜質,推薦流速為100 cm/h。

                                      3.4 洗脫:用洗脫緩沖液洗10 ~ 20個柱體積,建議流速為100 cm/h,收集的洗脫液應立即調節pH至穩定范圍,并根據需要置換緩沖液。

                                      3.5 NaOH再生:洗脫目的蛋白后的柱子用蒸餾水清洗3 ~ 5個柱體積,并用0.5 M NaOH再生3 ~ 5個柱體積,再用蒸餾水清洗至中性,用20%乙醇保存柱子,或進行下一次純化。

                                      3.6 HABA再生:用脫硫生物素洗脫目的蛋白的,還可以用HABA緩沖液再生,一般用HABA的結合緩沖液洗15個柱體積,再用結合緩沖液洗30個柱體積,然后可以用20%乙醇保存柱子,或進行下一步純化。HABA上柱后凝膠顏色會變為紅橙色,在結合緩沖液平衡后會恢復正常的白色,這種再生方式一般使用體積會大些。

                                      導購指南

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                                      產品描述

                                      重力預裝柱

                                      Strep-Tactin瓊脂糖凝膠FF重力預裝柱

                                      Strep-Tactin瓊脂糖凝膠FF pre-packed column

                                      NRPB42S-Z11

                                      1*1mL

                                      1支*1ml

                                      NRPB42S-Z41

                                      4*1mL

                                      4支*1ml

                                      NRPB42S-Z15

                                      1*5mL

                                      1*5mL

                                      NRPB42S-Z25

                                      2*5mL

                                      2支*5mL

                                      AKTA中壓預裝柱

                                      Strep-Tactin瓊脂糖凝膠FF中壓預裝柱

                                      Strep-Tactin瓊脂糖凝膠FF pre-packed column

                                      NRPB42S-Y11

                                      1*1mL

                                      1支*1ml

                                      NRPB42S-Y41

                                      4*1mL

                                      4支*1ml

                                      NRPB42S-Y15

                                      1*5mL

                                      1*5mL

                                      NRPB42S-Y25

                                      2*5mL

                                      2支*5mL

                                      填料

                                      Strep-Tactin瓊脂糖凝膠FF

                                      Strep-Tactin瓊脂糖凝膠FF

                                      NRPB42L-10

                                      10mL

                                      1瓶*10ml

                                      NRPB42L-20

                                      20mL

                                      1瓶*20ml

                                      NRPB42L-100

                                      100mL

                                      1瓶*100ml

                                      NRPB42L-500

                                      500ml

                                      1瓶*500ml

                                      注:紐龍生物填料體積為實際瓊脂糖凝膠體積


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