NRPB01L 重組蛋白A瓊脂糖凝膠FF

                                      發布日期:2018-10-27 閱讀次數:9532

                                      品  名: 重組蛋白A 瓊脂糖凝膠FF

                                      英文名: Recombinant Protein A NUPharose Fast Flow, rProtein A NUPharose FF

                                      目錄號: NRPB01L、NRPB01S(預裝柱)

                                      規  格: 20 ml,100 ml,1 L,1 ml預裝柱,5 ml預裝柱,特殊規格訂制

                                      運  輸: 2 ~ 25℃,常壓、避光

                                      貯  存: 20%乙醇,2 ~ 8℃

                                      保質期: 3 年


                                      相關介紹: 

                                      蛋白A是一種金黃色葡萄球菌細胞壁蛋白質,包含有5個區域,可以同IgG的Fc片段結合。作為一個親和配基,蛋白A能夠比較緊密地偶聯到NUPharose上,使得這些區域可以同游離的IgG自由結合。一分子的蛋白A可以結合兩分子的IgG。


                                      技術指標:

                                      基質

                                      4%高度交聯瓊脂糖凝膠

                                      配基

                                      重組蛋白A

                                      配基密度

                                       6 mg/ml

                                      填料粒徑

                                      60 ~ 180 μm

                                      最大流速

                                      800 cm/h

                                      推薦流速

                                      20 ~ 100 cm/h

                                      pH穩定性

                                      pH 3 ~ 9

                                      耐反壓

                                      0.3 MPa

                                      載量

                                      ≥40 mg/ml IgG


                                      抗體與蛋白A、蛋白G的結合力:

                                      種類

                                      Species

                                      亞型

                                      Antibody Class

                                      蛋白A

                                      Protein A

                                      蛋白G

                                      Protein G

                                      Human

                                      IgG1

                                      IgG2

                                      IgG3

                                      IgG4

                                      IgM

                                      IgD

                                      IgA

                                      Fab

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                                      小鼠

                                      Mouse

                                      IgG1

                                      IgG2a

                                      IgG2b

                                      IgG3

                                      IgM

                                      +

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                                      大鼠

                                      Rat

                                      IgG1

                                      IgG2a

                                      IgG2b

                                      IgG2c

                                      +

                                      -

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                                      Cow

                                      IgG1

                                      IgG2

                                      +

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                                      山羊

                                      Goat

                                      IgG1

                                      IgG2

                                      +

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                                      Horse

                                      IgG(ab)

                                      IgG(c)

                                      IgG(T)

                                      +

                                      +

                                      -

                                      -

                                      -

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                                      Rabbit

                                      IgG

                                      +++

                                      +++

                                      Pig

                                      IgG

                                      +++

                                      +

                                      Dog

                                      IgG

                                      +++

                                      +

                                      Chicken

                                      IgY

                                      -

                                      -

                                      注:-表示不結合;+表示微弱結合;++表示中等結合;+++表示很強結合。


                                      應用舉例:

                                      結合緩沖液:20 mM磷酸緩沖液,150 mM NaCl,pH 7.4

                                      洗脫緩沖液:0.1 M檸檬酸緩沖液,pH 4.0

                                      中和緩沖液:1 M Tris ~ HCl,pH 9.0

                                      1)1 ml重組蛋白A瓊脂糖凝膠預填柱用5 ~ 10個柱床體積的蒸餾水洗去保存液;

                                      2)用結合緩沖液結合緩沖液平衡 5 ~ 10個柱床體積;

                                      3)將5 ml兔多抗血清用結合緩沖液稀釋到50 ml,0.45 μm濾膜過濾上樣;

                                      4)用結合緩沖液再洗 5 ~ 10個柱床體積;

                                      5)用洗脫緩沖液洗脫抗體,收集洗脫峰,并用中和緩沖液調節其pH至中性;

                                      6)每次使用后用3 ~ 5個柱床體積的0.1 M 檸檬酸緩沖液(pH 3.0)再生清洗;

                                      7)SDS-PAGE(圖1)電泳分析洗脫下來的兔多抗純度在95%以上。


                                      圖片44.jpg

                                      圖 1


                                      注意事項:

                                      1)預填柱使用簡易方便,在沒有儀器設備的條件下也可以完成純化任務。

                                      2)樣品洗脫后一般pH很低,應立即用堿性中和緩沖液(如1 M Tris-HCl,pH 9.0)將收集到的抗體溶液中和到中性,或在收集容器中事先裝5% ~ 20%、pH 7 ~ 9的緩沖液(如1 M Tris-HCl或1 M 磷酸緩沖液),以利于維持抗體的生物活性,避免抗體失活。

                                      3)使用時保證柱子和緩沖液的溫度一致,避免柱床內產生氣泡,影響純化效果,如果已經產生氣泡,可以自行重裝柱子。

                                      4)通常(每次)目標樣品洗脫后應繼續用0.1 M檸檬酸緩沖液(pH 2 ~ 3)洗3 ~ 5個柱體積,然后用平衡緩沖液清洗5個柱體積以上,作簡易再生。

                                      5)使用數次后應進行在位清洗,建議用0.1% Triton X-100 37℃洗1 ~ 3個柱體積(10 ~ 30 min),立即用平衡緩沖液清洗5個柱體積以上;或70%乙醇洗5個柱體積以上(可保持4 ~ 16 h),再用平衡緩沖液清洗5柱體積以上。在位清洗能去除強疏水性蛋白質和脂類,恢復柱子的載量和流速。

                                      6)

                                      推薦流速

                                      預裝柱體積ml

                                      1 ml

                                      5 ml

                                      10 ml

                                      流速(ml/min)

                                      0.2

                                      1

                                      2

                                      導購指南

                                      中文名

                                      英文簡稱

                                      貨號

                                      規格

                                      產品描述

                                      重力預裝柱

                                      重組蛋白A瓊脂糖凝膠FF重力預裝柱

                                      ProA NUPharose FF pre-packed column

                                      NRPB01S-Z11

                                      1*1mL

                                      1*1ml

                                      NRPB01S-Z41

                                      4*1mL

                                      4*1ml

                                      NRPB01S-Z15

                                      1*5mL

                                      1*5mL

                                      NRPB01S-Z25

                                      2*5mL

                                      2*5mL

                                      AKTA中壓預裝柱

                                      重組蛋白A瓊脂糖凝膠FF中壓預裝柱

                                      ProA NUPharose FF pre-packed column

                                      NRPB01S-Y11

                                      1*1mL

                                      1*1ml

                                      NRPB01S-Y41

                                      4*1mL

                                      4*1ml

                                      NRPB01S-Y15

                                      1*5mL

                                      1*5mL

                                      NRPB01S-Y25

                                      2*5mL

                                      2*5mL

                                      填料

                                      重組蛋白A瓊脂糖凝膠FF

                                      ProA NUPharose FF

                                      NRPB01L-10

                                      10mL

                                      1*10ml

                                      NRPB01L-20

                                      20mL

                                      1*20ml

                                      NRPB01L-100

                                      100mL

                                      1*100ml

                                      NRPB01L-500

                                      500ml

                                      1*500ml

                                      注:紐龍生物填料體積為實際瓊脂糖凝膠體積


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